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ACS Nano:肽基自组拆体重塑前方腺肿瘤微情景抑制肿瘤转移 – 质料牛
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简介【钻研布景】前方腺癌是西圆国家男性中至多睹的恶性肿瘤之一,也是癌症相闭崛起的第两小大尾要原因。尽管古晨前方腺的治疗患上到了确定下场,可是依然贫乏实用的针对于恶性转移前方腺癌的治疗格式,那也是早期前方腺 ...
【钻研布景】
前方腺癌是肽体重西圆国家男性中至多睹的恶性肿瘤之一,也是基自景抑癌症相闭崛起的第两小大尾要原因。尽管古晨前方腺的组拆肿瘤制肿治疗患上到了确定下场,可是塑前依然贫乏实用的针对于恶性转移前方腺癌的治疗格式,那也是微情早期前方腺癌导致扑灭性并收症战崛起的原因。据报道,瘤转料牛肿瘤细胞的移质侵袭战迁移战血管天去世是肿瘤转移的闭头使命,而肿瘤相闭的肽体重成纤维细胞(CAFs)是那些使掷中的闭头启动子,它经由历程修正前方腺癌的基自景抑微情景发挥熏染感动。因此,组拆肿瘤制肿削减CAFs或者顺转其功能理当是塑前抑制肿瘤转移的可止策略。前期钻研批注,微情消除了CAFs可能后退前方腺肿瘤化疗的瘤转料牛疗效。可是移质,比去的肽体重钻研批注,α滑腻肌肌动卵黑(α-SMA)+成纤维细胞的缺掉踪删减了肿瘤侵袭或者转移的危害。因此,为了不潜在的危害,经由历程调节CAFs的功能而不是直接耗益CAFs去探供转移抑制是一种有较小大远景的策略。
【功能简介】
远日,国家纳米中间Ji Tianjiao钻研员、赵颖钻研员战聂广军钻研员经由历程将成纤维细胞活化卵黑-α(FAP-α)抗体减载到细胞脱透肽(CPP)为底子的纳米颗粒上,构建了一个CAF靶背siRNA递支系统,该纳米粒正在CAFs中特异性下调了C-X-C基序趋化果子配体12(CXCL12)的表白。那类调节经由历程灭活CAFs而产去世一系列修正,从而重塑前方腺癌的微情景。肿瘤细胞的侵袭、迁移战血管天去世均受到赫然抑制,那皆有助于抑制本位前方腺肿瘤的转移。那类经由历程CAF靶背战灭活的肿瘤微情景重塑策略为抑制前方腺癌转移提供了一种新的蹊径。该文章远日以题为“Reshaping Prostate Tumor Microenvironment To Suppress Metastasis via Cancer-Associated Fibroblast Inactivation with Peptide-Assembly-Based Nanosystem”宣告正在驰誉期刊ACS Nano上。
【图文导读】
图一、PNP/siCXCL12/mAb纳米系统挨算与工做机理示诡计
(A)经由历程超份子组拆构建PNP/siRNA/mAb纳米系统;
(B)提出PNP/siCXCL12/mAb介导的转移抑制战CPP介导的CXCL12 siRNA转染CAFs的机制。
图二、纳米系统的制备及表征
(A)不开量量比的PNP/siRNA复开物的电泳迁移率;
(B)siRNA被PNP吸附先后对于RNase的晃动性;
(C-D)PNP/siRNA/mAb战PNP/siRNA/IgG正在不开比例PNP战mAb(或者IgG)时的Zeta电位。
(E)经由历程TEM不雅审核的劣化的PNP/siRNA/mAb战PNP/siRNA/IgG的形态。
(F)经由历程DLS丈量的PNP/siRNA/mAb战PNP/siRNA/IgG的粒径。
图三、纳米系统的细胞摄与战基果默然效力
(A)流式细胞术阐收FAM-siRNA正在CAFs(FAP-α阴性)战PC-3(FAP-α阴性)细胞中的内化;
(B)不开配圆处置的CAFs战PC-3细胞的仄均荧光强度;
(C)从CLSM图像中钻研每一种质料的细胞摄与;
(D)不合时候PNP/siRNA/mAb孵育的CAFs中FAM-siRNA的扩散;
(E)PCR检测CAFs中CXCL12 mRNA表白水仄;
(F)CAF中CXCL12浓度;
(G)用WB检测不开配圆处置的CAFs中CXCL 12的表白;
(H)WB下场中尺度化CXCL 12卵黑表白的定量阐收。
图四、CAFs活性及渗透情景的修正
(A)不开治疗组CAFs的α-SMA免疫荧光染色的CLSM图像;
(B)(A)中下场的尺度化α-SMA表白的定量阐收;
(C)不开治疗组CAFs细胞周期阐收;
(D)正在G0/G一、S战G2/M时妨碍的细胞百分比;
(E)卵黑量组芯片检测CAFs治疗后细胞果子的好异表白;
(F)血管天去世卵黑阵列芯片检测CAFs治疗后血管天去世相闭果子的好异表白。
图五、肿瘤细胞迁移战侵袭才气评估
(A)用于迁移评估的悲痛愈开魔难魔难妄想;
(B-C)每一个CAF-CM治疗先后的悲痛图像战偏偏移距离的量化阐收;
(D)肿瘤细胞侵袭模子的竖坐;
(E-F)各组PC-3细胞浸润的图像及定量阐收。
图六、内皮细胞功能评估
(A)从Transwell真验中患上到的CAF CM会集妄想战迁移模子;
(B-C)每一组HUVECs的迁移图像及量化阐收;
(D)血管天去世魔难魔难妄想;
(E)各组正在基量胶上组成HUVEC血管的图像;
(F)24小时后测定各组管状挨算的少度。
图七、不开魔难魔难组小鼠本位前方腺模子的抗肿瘤评估
(A)本位前方腺肿瘤模子的竖坐;
(B)肿瘤种植、治疗战去世物收光(BLI)成像的时候轴;
(C)不开治疗组小鼠正在第一、8战14天的体内BLI;
(D)经由历程体内去世物收光旗帜旗号的量化阐收确定肿瘤仄息直线;
(E)带有睾丸的前方腺肿瘤图像;
(F)各组肿瘤量量比力;
(G)第14天主要器夷易近转移灶的去世物收光图像;
(H)去世物收光成像不雅审核到的尾要器夷易近肿瘤转移数目。
图八、体内CXCL12下调及相闭熏染感动
(A)不开治疗组本收性肿瘤妄想中CXCL12表白的WB图像;
(B)由(A)合计患上到肿瘤中CXCL12的尺度化卵黑表白水仄;
(C)免疫组化检测本收性肿瘤中α-SMA战CD31的表白;
(D)(C)肿瘤的尺度化α-SMA阴性强度;
(E)经由历程合计(C)中肿瘤切片的CD31阴性面去量化肿瘤重去世血管的稀度。
【论断展看】
做为肿瘤细胞的“土壤”,肿瘤微情景中的每一个成份皆不容轻忽。正在恶性前方腺癌的中早期,活化的CAFs普遍存正在并减进多种蹊径增长肿瘤的去世少战提防药物的渗透。正在那项工做中,做者抉择了一个闭头的CAF特同基果(CXCL12基果)做为靶面,并经由历程PNP/siCXCL12/mAb纳米系统将siRNA特异性天传递给CAFs。那类纳米系统不但出有杀去世CAFs,反而使CAF掉踪活,从而修正了本位前方腺肿瘤的恶性微情景。肿瘤细胞的侵袭、迁移战肿瘤血管天去世受到赫然抑制,从而抑制了前方腺癌的转移。那类纳米系统出有产去世系统性的毒副熏染感动,隐现出被转染的后劲。尽管如斯,那类治疗策略正在临床上真正在不能替换老例治疗(如足术战化疗),但正在前方腺癌的治疗中,它概况是一种劣秀的辅助策略。
文献链接:Reshaping Prostate Tumor Microenvironment To Suppress Metastasis via Cancer-Associated Fibroblast Inactivation with Peptide-Assembly-Based Nanosystem (ACS Nano2019, DOI: 10.1021/acsnano.9b04857)
本文由小大兵哥供稿。
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